Menu

Amish Hand Quilting for Custom Handcrafted Amish Quilts and affordable hand quilting services.

Réduction de la croissance et de la production d’exotoxines de Staphylococcus aureus et des taux d’interleukine vaginale due au monolaurate de glycérol dans les tampons

Contexte Le syndrome de choc toxique menstruel staphylococcique dépend de la production vaginale d’exotoxines GML inhibe la production d’exotoxines Staphylococcus aureus in vitro Le but de cette étude était de déterminer si le GML, en tant que finition de fibre de tampon, inhibe la production d’exotoxines et l’interleukine IL-cytokine. Utilisation des tamponsMéthodesLe jour de la menstruation, quand les comptes vaginaux S aureus sont élevés chez les femmes colonisées, les participants à l’étude ont échangé leurs propres tampons, après les avoir portés pour des tampons d’étude avec ou sans GML assignés aléatoirement et à l’aveugle. h Les tampons des femmes et les tampons d’étude avec ou sans GML ont été testés pour S aureus, toxine du syndrome de choc toxique exotoxines et α-toxine, et IL-ResultsA total des femmes a terminé l’étude S aureus était présent dans les tampons des femmes% Des nombres plus faibles de S aureus et des exotoxines ont été détectés dans les tampons d’étude avec ou sans GML que chez les femmes. ampères; Le niveau d’IL était plus faible dans les tampons des femmes sans S aureus vaginal que chez les femmes avec S aureus et était plus faible dans les tampons d’étude avec GML que dans les tampons d’étude sans Ces résultats suggèrent que le GML ajouté aux tampons offre une sécurité supplémentaire par rapport au syndrome de choc toxique menstruel ainsi que des avantages pour la santé vaginale en général. , soutenant ainsi l’ajout de GML aux tampons

Syndrome de choc toxique TSS causée par Staphylococcus aureus est une maladie à médiation toxine caractérisée par de la fièvre, hypotension, éruption cutanée, atteinte de plusieurs organes et desquamation de la peau […] La TSS menstruelle se manifeste chez les femmes pendant et avant les jours précédents. ou après les règles, principalement chez les femmes utilisant des tampons La maladie est causée par des superantigènes La plupart des cas de mTSS sont causés par la superantigène toxine TSS TSST- [, -] Bien que la mTSS est mieux connue par une augmentation apparente des cas à la fin Au début, des études récentes ont suggéré que l’incidence de la mTSS est de – cas par menstruations féminines par an et, par conséquent, que mTSS reste un problème de santé Superantigènes sont des exotoxines qui stimulent les cellules T hôtes, affichant des régions variables de la chaîne β des récepteurs des lymphocytes T Vβ-TCR Contrairement aux antigènes conventionnels, qui stimulent les lymphocytes T, les superantigènes se lient aux Vβ-TCR de sorte que jusqu’à 100% des lymphocytes T peuvent être stimulés. Les superantigènes se lient également à α-ch ain, β-chain, ou les deux molécules majeures d’histocompatibilité complexes de classe II sur les cellules présentatrices d’antigènes APC, réticulant le complexe majeur d’histocompatibilité classe II avec Vβ-TCR Le résultat de l’interaction superantigène avec les cellules T et APC est une production massive de cytokines, telles que le facteur de nécrose tumorale et l’interleukine β , qui explique de nombreuses caractéristiques cliniques des études TSSRecent ont suggéré que les exotoxines staphylococciques endommageant la membrane, comme la toxine α, facilitent la pénétration du TSST dans le tissu vaginal par cytotoxicité. et une perturbation pro-inflammatoire de la muqueuse L’exposition du tissu vaginal ex vivo porcin à l’α-toxine, un excellent modèle, entraîne une pénétration accrue de TSST-, effusion épithéliale, et une séparation de l’épithélium de la sous-muqueuse comparable à celle observée dans les études d’autopsie de patients atteints de mTSS On a rapporté que le monolaurate de glycérol monoester d’acide gras GML inhibait la production d’exotoxines staphylococciques in vitro; GML inhibe la production d’exotoxine au niveau de la transcription en interférant avec la transduction du signal membranaire Les monoglycérides sont généralement répertoriés dans le Code of Federal Regulations CFR § comme « généralement reconnu comme sûr » pour une utilisation dans les aliments, et GML est couramment utilisé dans une variété. La présente étude a été entreprise pour étudier la capacité de GML en tant que fini fibreux sur les tampons menstruels à inhiber la production vaginale de toxines TSST et α par S aureus chez des femmes en bonne santé et à déterminer si GML- les tampons finis peuvent réduire l’inflammation vaginale mesurée par la production d’interleukine IL-, une chimiokine pro-inflammatoire qui attire les leucocytes polymorphonucléaires

Matériaux et méthodes

l, médicament antifongique ou immunosuppresseur dans les semaines précédant l’inscription à l’étude; antécédents d’infection sexuellement transmissible au cours des derniers mois; antécédents de dysplasie vulvaire, vaginale ou cervicale, de néoplasie ou de cancer; infection connue avec le virus du papillome humain ou le virus de l’immunodéficience humaine VIH; antécédents de radiothérapie pelvienne au cours des dernières années; type incontrôlé ou diabète sucré; ou l’utilisation de stéroïdes systémiquesDétection et identification des tampons aureuson Les poids secs des tampons d’étude avec ou sans GML ont été déterminés par pesée de chaque type; Les poids secs des tampons commerciaux utilisés par les participants à l’étude comme leurs propres tampons ont été déterminés par pesée de chaque type Les poids nets utilisés ont été utilisés comme estimations de la quantité de liquide menstruel absorbée par les tampons pendant l’utilisation et pour les calculs des numérations de S aureus, exotoxines et IL- quantités par volume de liquide menstruel absorbéUn écouvillon stérile a été touché à chaque tampon pour la détection de S aureus Nos études antérieures ont montré que S aureus est assez uniformément réparti dans tous les tampons utilisés dans les zones avec et sans menstrues , indiquant que cette méthode d’échantillonnage fournit une indication raisonnablement fiable de la présence de S aureus Après avoir tamponné chaque tampon, l’écouvillon a été roulé sur une plaque de gélose au sang qui a ensuite été striée pour l’isolement Le tampon a ensuite été immédiatement traité avec des mL de tampon phosphate solution saline mol / L NaPO [pH] et mol / L NaCl et agitée pendant ~ min Le contenu a été exprimé à travers une seringue -mL, et le sang exprimé a été stocké à ° C La plaque de gélose au sang a été incubée à ° C pendant une nuit en présence de% CO S aureus colonies ont été identifiées après incubation pendant la nuit à travers leurs caractéristiques morphologiques et ont été classées comme Gram positif, catalase positive et coagulase positive. quantifier S aureus sur les tampons, les liquides exprimés ont été dilués en série dans une solution saline tamponnée au phosphate, étalés sur des plaques de gélose Todd-Hewitt, et incubés à ° C pendant une nuit S aureus ont été identifiés et comptés, et la quantité totale de S aureus On a calculé la quantité par millilitre de liquide menstruel. Quantification de TSST-, α-toxine et IL- dans les fluides exprimés à partir des tampons usés Pour déterminer si les souches de S aureus isolées des tampons étaient capables de produire TSST-, les isolats ont été cultivés pendant une nuit à Plaques d’agar Todd-Hewitt% Ensuite, des puits de mm ont été perforés dans les plaques d’agar mm des organismes en croissance. L’antisérum hyperimmun contre TSST-μL était un Chaque plaque a été réincubée à ° C et après un examen supplémentaire de h plaques ont été examinées pour une ligne d’immunoprécipitation résultat positif Pour détecter TSST- et α-toxine dans les tampons S aureus-positifs, un échantillon de fluide menstruel exprimé a été traité avec des volumes d’éthanol absolu pour précipiter quantitativement les exotoxines Les précipités ont été restaurés à un dixième de leur volume initial et soumis à une électrophorèse sur gel de dodécylsulfate de sodium-polyacrylamide ; des expériences antérieures ont établi que cette technique sépare efficacement les exotoxines des anticorps potentiellement confondants aux toxines qui peuvent être présentes dans les règles Des immunoblots occidentaux ont été utilisés pour quantifier les quantités de TSST et α-toxine par comparaison aux courbes standards générées avec TSST- et purifiées. Des immunoblots Western de toxine a ont été analysés pour déterminer la zone de la bande par rapport aux étalons de toxine purifiés, en utilisant un programme informatique fourni par le National Institutes of Health ImageJ S; disponible à l’adresse: http: // rsbinfonihgov / ij / Les courbes standard ont systématiquement donné Rvalues ​​& gt ;, indiquant que cela fournissait une excellente mesure quantitative des exotoxines Bien que non initialement prévu, nous avons demandé et reçu l’approbation du conseil d’examen institutionnel pour examiner les IL- dans les propres et les tampons de l’étude en raison de la pertinence possible de cette cytokine pro-inflammatoire à l’axe principal de l’étude: la production d’IL par les cellules épithéliales vaginales humaines en culture est régulée par l’α-toxine et TSST-, IL- peut être impliquée dans affaiblissement de l’intégrité de la barrière épithéliale vaginale par l’induction de l’inflammation, et les taux d’IL vaginale sont plus élevés chez les femmes ayant des infections vaginales que chez les femmes en bonne santé Pour quantifier IL-, les échantillons de fluides exprimés les globules rouges et les bactéries, et les surnageants ont été dosés en utilisant des kits de dosage immuno-enzymatiques couplés à une enzyme colorimétrique Quantikine Systèmes R & D: quantités totales de TSST-, toxine, et IL- et les quantités de chaque par millilitre de menstrues ont été déterminées. Analyses statistiques Les moyennes et les écarts-types ont été déterminés. Le test t de Student a été utilisé pour déterminer l’importance des différences entre les tampons; tests t appariés ont été utilisés pour comparer les données de tampon d’étude des femmes avec ou sans GML et leur propre tampon, et t tests non appariés ont été utilisés pour évaluer les différences entre les tampons d’étude avec et sans GML

Résultats

Prévalence des tampons propres aux femmes aureusines et des tampons d’étude Nous avons confirmé que la quantité de tampons absorbés ne différait pas entre les tampons des femmes et les tampons d’étude ou entre les tampons d’étude avec ou sans GML. que les comptes du S aureus vaginal sont maximaux à ce moment S aureus a été prédit être présent dans les tampons de% -% des femmes pendant leurs périodes menstruelles [,,] Dans la présente étude,% des participants ont été colonisés par S aureus, comme déterminé à partir de leurs tampons Deux femmes différentes qui avaient S aureus détectable présent sur leurs tampons avaient aussi Proteus présent en essaim, ce qui empêchait la quantification précise de S aureus dans ces tampons Pour le reste des femmes colonisées par S aureus n =, formant une colonie les totaux et le millilitre des règles absorbées étaient légèrement mais significativement plus élevés dans les propres tampons des femmes que dans les tampons d’étude avec ou sans GML. Cependant, les données indiquent que les composants des tampons étudiés sont modérément inhibiteurs de S aureus comparativement à ceux qui ne contiennent pas de GML. les propres tampons des femmes

Vue de la table grande diapositive de téléchargementMens absorbés dans les propres tampons de femmes et dans les tampons d’étude avec ou sans glycérol Monolaurate GMLTable Voir grandDispositions de diapositives absorbées dans les propres tampons des femmes et dans les tampons d’étude avec ou sans glycérol Monolaurate GML

Table View largeTélécharger slideStaphylococcus aureus sur les propres tampons des femmes par rapport aux tampons d’étude avec ou sans glycérol Monolaurate GMLTable View largeTélécharger slideStaphylococcus aureus sur les propres tampons des femmes par rapport aux tampons d’étude avec ou sans glycérol Monolaurate GMLIn vivo effet de GML surS production aureusexotoxine des souches de S aureus isolé de tampons, ~% ont été jugés capables de faire TSST- Ce chiffre concorde bien avec notre expérience antérieure que% -% de S aureus vaginal rendre TSST-TSST- était quantifiable seulement dans les tampons qui contenaient TSST-positif S aureus, indiquant que la toxine ne peut pas toujours être produite in vivo ou est souvent produite seulement en quantités minuscules Toutes ces femmes ont été assignées au hasard au groupe de tampon d’étude contenant GML TSST- niveaux détectés dans toutes les tampons propres des femmes montant total , ± μg; la quantité dans les règles absorbées, ± μg / mL était plus élevée que les niveaux détectés dans les tampons d’étude avec un total de ± 1 μg de GML; ± μg / mL Ces différences n’étaient pas statistiquement significatives en raison de la variabilité des taux de TSST chez les participants à l’étude. Contrairement à la TSST, la toxine α était quantifiable en% des tampons des femmes avec S aureus Table, ce qui était attendu parce que beaucoup de souches de S aureus sont capables de produire cette exotoxine En moyenne, μg de total de toxine α μg / mL a été détecté dans les propres tampons des femmes, ce qui était significativement plus élevé que la quantité trouvée dans leurs tampons avec ou sans GML μg total; μg / mL Entre les tampons de l’étude, les tampons sans GML avaient significativement plus de total de α-toxine μg; μg / mL que les tampons avec GML μg total; Tableau μg / mL

Vue de la table largeDétaillant de l’α-toxine et de l’interleukine-IL détecté dans les tampons et les tampons d’étude des femmes avec ou sans monolaurate de glycérol GMLTable View largeTéléchargement de la quantité de α-toxine et d’interleukine IL détectée dans les propres tampons et tampons d’étude avec ou sans monolaurate de glycérol GMLEffet de GML sur vaginal IL- Les propres tampons de femmes avec S aureus présent avaient des niveaux significativement plus élevés de IL-moyennage ng total; ng / mL que les tampons dans lesquels S aureus n’a pas été détecté en moyenne ng total; ng / mL Les taux d’IL-Table étaient également significativement plus élevés dans les tampons d’étude contenant S aureus avec ou sans GML ng total; ng / mL que dans les tampons d’étude sans S aureus avec ou sans GML ng total; ng / mL Tableau Parmi les femmes dont les tampons ne contenaient pas de S aureus, les tampons d’étude avec GML présentaient des niveaux significativement plus bas de total d’IL-ng; ng / mL que l’étude des tampons sans GML ng total; Tableau ng / mL Chez les femmes atteintes de S aureus, les tampons d’étude avec GML présentaient également des niveaux moindres de total d’IL-ng; ng / mL que l’étude des tampons sans GML ng total; ng / mL, mais cette différence n’était pas statistiquement significative en raison du nombre relativement faible de femmes atteintes de S aureus comparativement au nombre qui manquait de S aureus Tableau Autres observations Aucun effet indésirable n’a été signalé par les participants Comme les échantillons étaient analysés tôt dans l’étude Nous avons noté des exemples de changements substantiels dans le nombre de streptocoques et de lactobacilles du groupe B entre les tampons des femmes et les tampons d’étude. Ces évaluations ont révélé des cas de streptocoques du groupe B dans les tampons des femmes. En outre, dans certains cas, les tampons des femmes ne contenaient pas de lactobacilles détectables, mais leurs tampons d’étude présentaient un nombre élevé de lactobacilles. Dans tous ces cas, l’étude les tampons contenaient encore du GML

Discussion

Après l’enlèvement des tampons les plus absorbants du marché de la consommation au début des années, l’incidence de la TVMS a diminué d’un cas à l’autre, les femmes menstruées par année. Les examens récents des hôpitaux de Minneapolis et St Paul, Minnesota Les centres de contrôle et de prévention des maladies et la Food and Drug Administration estiment que le mTSS est un risque important pour la santé des femmes ayant leurs règles. Plusieurs études ont suggéré que La présence d’oxygène piégé à l’intérieur du tampon introduit dans un environnement normalement anaérobie, avec des tampons plus absorbants et plus absorbants, introduisant plus d’oxygène que les tampons plus faibles et moins absorbants est à la base de l’association entre tampons et mTSS que l’oxygène est un facteur essentiel pour la production de TSST par S aureus Cela continue d’être important parce que de nouvelles souches de S au Ces découvertes, combinées à l’augmentation du S aureus résistant aux antibiotiques, illustrent la nécessité de développer de nouvelles stratégies pour contrôler la production d’exotoxine par le S aureus vaginal. Plusieurs études ont démontré la capacité de GML in vitro pour inhiber la production d’exotoxines par des bactéries gram-positives, y compris TSST- et α-toxine par S aureus [,,] Jusqu’à récemment, aucune étude formelle sur la sécurité GML dans l’utilisation à long terme n’a été menée. maintenant montré que GML mg / mL est sûr lorsqu’il est appliqué par voie vaginale dans un gel une ou deux fois par jour pendant des mois; le traitement n’a pas provoqué de modifications histologiques indésirables de l’épithélium vaginal et n’a pas réduit le nombre de lactobacilles vaginaux Les résultats de la présente étude démontrent que le GML, lorsqu’il est ajouté aux tampons comme% de fibres, est capable de réduire l’exotoxine En plus de ses effets négatifs sur certaines bactéries potentiellement pathogènes, GML peut également avoir des effets bénéfiques sur les cellules eucaryotes GML stabilise les cellules eucaryotes contre les dommages induits par les solutions hypotoniques, les exotoxines et les lipopolysaccharides En outre, GML réduit T prolifération des cellules B et la production de cellules épithéliales vaginales humaines de cytokines pro-inflammatoires en réponse à des agents mitogènes L’inflammation vaginale induite par divers agents pathogènes semble augmenter la perméabilité de la barrière épithéliale à d’autres pathogènes, tels que le VIH- [,,] la production de cytokines par les cellules épithéliales vaginales, y compris la chimiokine pro-inflammatoire attire spécifiquement les leucocytes polymorphonucléaires – est supposé jouer un rôle important dans la pénétration de TSST – à travers la muqueuse vaginale TSST- doit pénétrer dans la muqueuse vaginale et accéder aux tissus sous-jacents, où il interagit avec les cellules T et les macrophages APC TSS Dans la présente étude, nous avons trouvé que les niveaux de IL-in dans les tampons usagés étaient significativement plus élevés chez les femmes colonisées vaginalement avec S aureus que chez les femmes moins colonisées, ce qui indique que S aureus dans le vagin peut contribuer à l’inflammation vaginale. ont également des effets indésirables sur la santé vaginale au-delà du risque de mTSS Nous avons également constaté que les taux de tampons IL- dans les tampons étaient plus faibles chez les femmes qui utilisaient les tampons GML que chez les femmes qui n’utilisaient pas les tampons GML. – les niveaux sont physiologiquement significatifs comme le suggère le raisonnement précédent, cette dernière constatation suggère que l’inflammation vaginale a été réduite pendant l’utilisation des tampons contenant GML. L’effet a été observé chez les femmes non colonisées par S aureus ainsi que chez les femmes colonisées, il semble que les effets du GML sur l’IL- étaient en partie dus à des effets directs sur les cellules épithéliales vaginales et / ou les lymphocytes des femmes. Dans la mesure où l’inflammation vaginale est révélatrice de la santé vaginale globale, ces résultats suggèrent que les tampons contenant GML pourraient avoir des avantages pour la santé vaginale au-delà de leur inhibition apparente de la production d’exotoxines par S aureus Collectivement, ces résultats suggèrent que l’utilisation de GML comme additif aux tampons peut être bénéfique pour la santé vaginale, car elle a le potentiel de réduire la production de TSST et d’α-toxine, ce qui pourrait réduire le risque de mTSS et réduire l’inflammation vaginale. GML pour cette application est renforcée par son étant relativement peu coûteux, ayant une longue histoire d’utilisation sûre dans les aliments et les cosmétiques, et d’être On a montré qu’il n’y avait pas d’effets indésirables sur l’histologie vaginale ou la microflore pendant des périodes prolongées d’application vaginale chez des singes rhésus

Remerciements

Conflits d’intérêts potentiels MLP et PMS étaient les bénéficiaires d’une subvention accordée à l’Université du Minnesota par Johnson & amp; Johnson qui a financé une partie de cette étude Ils n’ont pas reçu de compensation monétaire de Johnson & amp; Johnson PMS a servi de consultant pour Johnson & amp; Johnson pour d’autres activités non liées à cette étude DJC et MCP sont des employés de Johnson & amp; Johnson Tous les autres auteurs: no conflicts